很多的人都知道细胞是能够分化繁殖的,因此杂交细胞瘤也是能够如此的,因此杂交细胞瘤的筛选是很复杂的,只有依据科学的手段进行才能够保证安全,那么杂交瘤细胞该如何筛选呢?那么下面我就为大家来介绍一下这个问题吧。
1.在HAT培养基[属于选择性培养基,含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养,未融合的脾细胞因不能在体外长期存活而死亡;未融合的骨髓瘤细胞合成DNA的主要途径被培养基中的氨基蝶呤阻断,又因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用培养基中的次黄嘌呤完成DNA的合成过程而死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,因此能在HAT培养基中存活和增殖。经过克隆选择,可筛选出能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,在体内或体外培养,即可无限制地大量制备单克隆抗体。
2.仅仅就“两个细胞的融合”而言有三种,有“瘤-瘤”型融合细胞、“瘤-B”型融合细胞、“B-B”型融合细胞。(实际上,还有未融合细胞、三细胞融合....等)
选择性培养基:根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基.其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率.
以上就是我为大家介绍的杂交瘤细胞的筛选,按照上述的方法进行筛选,这样才能够保证细胞不会过多的死亡,保证细胞的融合和存活的时间等问题,出现了问题就需要及时的咨询专业人士进行咨询,这样才能够保证顺利进行。